Soutenance de thèse - Pierre Paillard - Amphithéâtre A - Bâtiment 2 - Campus Santé Villejean - Université De Rennes

Sous la direction de Kévin Macé et Reynald Gillet

La conjugaison bactérienne est un processus biologique par lequel une cellule donneuse transfère son ADN à une cellule receveuse, principal mécanisme de dissémination de gènes de résistances aux antibiotiques, contribuant majoritairement à la crise mondiale de l’antibiorésistance. Le transfert d’ADN est assuré par une large machinerie moléculaire intégrée aux membranes de la cellule donneuse, appelée Système de Sécrétion de type IV (T4SS) conjugatif. Pour établir le premier contact entre les deux bactéries, la cellule donneuse produit un long filament extracellulaire, le pilus conjugatif, essentiel au transfert d’ADN. Malgré son importance, la structure et les mécanismes impliqués dans ce contact initial restent mécompris. Notre projet vise ainsi à caractériser les mécanismes moléculaires de l’interaction avec la cellule receveuse par différentes approches de cryo-microscopie électronique.
À partir du système R388, nous avons purifié les pili et déterminé le premier complexe protéique distal d’un pilus conjugatif en résolvant sa structure à résolution atomique par cryo-EM SPA. Nous avons ensuite étudié les interactions entre le pilus et la membrane par cryo-ET STA. Nous avons également analysé la diversité des pointes de pili au sein des différentes familles de T4SS conjugatifs et caractérisé l’organisation de la machinerie active, après polymérisation du pilus. Enfin, nous avons déterminé la localisation, l’oligomérisation et la fonction de l’inhibiteur naturel de la conjugaison Eex, produit par les T4SS pour limiter les échanges d’ADN entre bactéries portant le même plasmide conjugatif. Ces résultats apportent des informations inédites sur la reconnaissance de la cellule receveuse à l’échelle moléculaires et mettent en évidence des potentielles cibles pour limiter la conjugaison bactérienne et la dissémination des gènes de résistance aux antibiotiques.
Composition du jury

• Dr. Cécile Breyton, DR CNRS, LISM Marseille

• Dr. Éric Cascales, DR CNRS, IBS Grenoble

• Dr. Catherine Guynet, CR CNRS, LMGM Toulouse

• Dr. Badreddine Douzi, CR CNRS, DynAMic Nancy

• Co Dir. de thèse : Pr. Reynald Gillet, PU Univ.Rennes, IGDR Rennes

• Dir. de thèse : Dr. Kévin Macé, CR CNRS, IGDR Rennes